Easy Editing Cas9 Enzyme

1. 产品简介：

Easy Editing Cas9 Enzyme是基于常用的S. pyogenes Cas9酶，进行基因工程改造，得到的高效、低脱靶的Cas9酶。我们通过在Cas9酶的N端和C端都加入NLS核定位序列，显著提高了Cas9酶向细胞核内的转运。编辑效率高达 85-90%且无细胞毒性。是用于KO/KI基因编辑的理想Cas9酶。

2. 产品组份和运输储存条件：

*备注：本试剂的Cas9酶浓度为10ug/uL，Cas9分子量约为163kD，换算成摩尔浓度为61uM（61pmol/uL）。每次使用1.5uL约等于92pmol。配置RNP时，通常按照Cas9酶：sgRNA=1.2~2范围内加入，对应sgRNA的加入量建议为110pmol~180pmol之间，假如sgRNA的浓度为100uM，则加入体积为1.1uL~1.8uL，常用1.5uL。

运输和储存条件：本品需干冰运输。到货后放置在-20℃冰箱3个月内用完，长期不使用须保存于-80℃冰箱。

3. 应用案例：对人体原代T细胞，敲除内源性TRAC，并敲入人工CAR序列，构建CAR-T细胞

图：采用本试剂盒，配合AAV病毒转导，一次基因编辑，CAR-T阳性率达到71.9%。

4. 其他相关产品

6. 引用文献

(1) Ran, F., Hsu, P., Wright, J. et al. Genome engineering using the CRISPR-Cas9 system. Nat Protoc 8, 2281–2308 (2013).

(2) Qi LS, Larson MH, Gilbert LA, Doudna JA, Weissman JS, Arkin AP, Lim WA. Repurposing CRISPR as an RNA-guided platform for sequence-specific control of gene expression. Cell. 2013 Feb 28;152(5):1173-83.

(3) Ren J, Liu X, Fang C, Jiang S, June CH, Zhao Y. Multiplex Genome Editing to Generate Universal CAR T Cells Resistant to PD1 Inhibition. Clin Cancer Res. 2017 May 1;23(9):2255-2266. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-16-1300. Epub 2016 Nov 4. PMID: 27815355; PMCID: PMC5413401.

 点击咨询客服